冷冻电镜和蛋白质晶体学方面的进步和新技术掀起了一场结构生物学革命,使研究人员能够解决更复杂的生物学问题,从而使科研工作也从中获益。 “整合”结构生物学集多种方法与一身,以便在细胞和分子水平上构建更全面的动态过程图景。 蛋白质晶体学仍然是高分辨率蛋白质结构研究的首选技术。
坐滴结晶是常用的蛋白质晶体学方法。就坐滴而言,mosquito的精确移液能确保液滴准确地排放到子孔中心,以便实现较理想的自动化成像效果,同时避免液滴吸附孔壁。
在药物研发中,为了研究蛋白质与其小分子配体的作用机理,用小分子配体浸泡蛋白质,是大规模获得其晶体结构的最快途径。 mosquito可以从配体库stock板上制备溶于 DMSO的浸泡液滴。 然后可以将小体积的这种稀释溶液分配到含有晶体的液滴中,节省时间和的配体用量。
mosquito ® 可以自动将液滴“镜像”排放在悬滴膜上,因此当悬滴膜倒扣在悬滴板上时,液滴与池液孔是相对应的。 精准定位和准确移液可以缩小液滴体积,而不会出现液滴重合的风险。 在 96 孔板的每个孔中最多可以产生三个液滴,使得每板可检测多达 288 种不同的条件。
也可以在mosquito上轻松设置悬滴法本的添加剂和微种晶法进行蛋白结晶。
用于膜蛋白结晶的脂质立方相 (LCP)彻底改变了如G蛋白偶联受体等高难度的结构研究。 对于处理脂质立方相 (LCP) 方法而言,mosquito® LCP 集以下四个重要方面于一身:
mosquito LCP使得研究人员能够转移低至30nL的脂立方相体积,而注射器和加样针定位的自动化校准确保了极其精确的液滴重合排放。
优化蛋白质结晶hits以提高衍射结果是一个具有挑战性的过程,确定最佳条件,即温度、pH 范围、沉淀剂和缓冲液的浓度范围都需要消耗大量的成本和时间。这个过程涉及到建立多项研究来分析每个独立参数,因此从试剂储存溶液中自动制备复杂的梯度可以节省时间,提高可实验重复性并增加高分辨率结构的产出。
dragonfly crystal提供了准确性和可重复性高的结果,其采用的新型移液技术能够将任何体积轻松地转移到任意孔中,从而简化结晶优化流程,消除交叉污染风险。
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